粗純的作用是分離差異較大的物質(zhì)，如固液分離、胞內(nèi)或胞外物質(zhì)分離，減少下游純化工藝的負擔。質(zhì)粒DNA粗純工藝包括離心、堿裂解和澄清過濾等。一般通過離心或過濾的方式實現(xiàn)固液分離，收集菌體；使用堿裂解法釋放質(zhì)粒DNA，隨后過濾去除懸浮物質(zhì)。由于小試與生產(chǎn)規(guī)模不同，耀海研發(fā)實驗室和車間匹配的離心設備也有所差異。然而離心參數(shù)的轉(zhuǎn)換尤其重要，很大程度上影響產(chǎn)品的質(zhì)量和收率。

因此小試發(fā)酵工藝放大至生產(chǎn)規(guī)模時，耀海團隊會判斷設備差異對工藝過程及產(chǎn)物的影響。耀海生物建議在小試與GMP生產(chǎn)的轉(zhuǎn)移過程中，增加中試放大的環(huán)節(jié)，以調(diào)整工藝參數(shù)使其高度契合生產(chǎn)規(guī)模。

耀海生物具有超十年微生物體系質(zhì)粒DNA和重組蛋白生產(chǎn)及服務經(jīng)驗，針對不同性能/品牌的離心設備積累了豐富的工藝放大經(jīng)驗。我們可識別并控制關(guān)鍵參數(shù)，成功實現(xiàn)粗純工藝的放大生產(chǎn)，有效去除雜質(zhì)的同時保證質(zhì)粒DNA的收率。

服務詳情

粗純工藝放大前后的差異

粗純工藝放大經(jīng)驗分享

離心和過濾的目的是實現(xiàn)固液分離，應用場景包括菌體收集、固形物去除等，離心設備關(guān)鍵參數(shù)包括轉(zhuǎn)速、進料速度和排渣時間，過濾的關(guān)鍵參數(shù)是濾膜孔徑、流速和濾器壓力。離心或過濾操作不達標會導致固液分離效果不佳，可能會降低產(chǎn)物收率、增加下游純化壓力，影響產(chǎn)品質(zhì)量。

耀海生物基于豐富的產(chǎn)物粗純服務經(jīng)驗，總結(jié)了離心和澄清過濾工藝轉(zhuǎn)移過程中的常見問題和解決方法：