分離純化的目的是去除粗提物中的其他雜質，獲得一定純度的目標產物。

小試純化工藝放大至生產規(guī)模時，耀海生物團隊會判斷工藝穩(wěn)定性或設備差異對工藝過程及產物的影響。我們建議在小試與GMP生產的轉移過程中，增加中試放大的環(huán)節(jié)，以驗證純化工藝的穩(wěn)定性和可行性，并對工藝參數(shù)加以調整使其高度契合生產規(guī)模。

層析是質粒DNA捕獲、中度純化和精度純化的重要工藝之一。耀海生物可提供中試規(guī)模的質粒DNA層析純化服務，滿足質粒經典三步法層析：凝膠過濾層析（分子篩, SEC）、嗜硫親和層析（AC）、陰離子交換層析（IEX），以及其他定制化層析工藝的中試放大需求，目的是高效捕獲超螺旋質粒，去除HCP、HCD與內毒素等殘留物質。

耀海生物具有十余年微生物體系質粒DNA和重組蛋白生產及服務經驗，我們能夠快速識別并控制關鍵參數(shù)，成功實現(xiàn)層析等純化工藝的放大。

服務詳情

純化工藝放大前后的差異

純化工藝放大經驗分享

純化放大生產時，第一步的過濾澄清必不可少。澄清的目的是進一步去除顆粒物質、避免對下游純化的不利影響，通常使用中空纖維或膜包完成，工藝轉移或放大過程中的關鍵參數(shù)包括處理批量、膜面積和流速。

層析純化，即采用不同的層析填料，將不同大小、電荷、極性和特異性的雜質去除，得到高純度目的產物的過程。

經典的質粒純化三步法層析為：

第一步通過分子篩/凝膠過濾層析（SEC）去除RNA；

第二步親和層析（AC）捕獲超螺旋質粒；

最后一步陰離子交換層析（ICX）去除內毒素。

層析工藝轉移中的關鍵參數(shù)包括：處理批量、柱體積、上樣體積和流速。

耀海生物生產團隊基于豐富的質粒生產服務經驗，總結了純化工藝轉移和放大過程中的常見問題和放大策略：